NATE지식

2015년 01월 07일 네이트 지식서비스가 종료됩니다.

지식 서비스 이용자 여러분께 우선 감사의 말씀 드리며, 네이트 지식 서비스를 2015년 1월7일 종료하게 되었음을 안내해드립니다. 서비스종료는 아래의 일정대로 진행됩니다. 종료 이후에는 서비스 이용이 제한되므로 반드시 상세내용을 확인해주시기 바랍니다.

상세내용보기

지식노트

[실험] 아밀라아제_활성_측정 .
| 12.09.03 02:44
추가지식 0 조회 522
지식공감
지식노트 내용
[실험] 아밀라아제_활성_측정

목차

실험제목 : 온도에 의한 효소활성 효과
-아밀라아제 활성 측정
-카테콜산화 효소 활성
1. 이론
2. 실험목적
3. 실험도구
4. 실험방법
5. 실험결과
6. 고찰
7. 참고문헌

 

본문

1. 이론
-아밀라아제 활성 측정
침 속의 알파 아밀라아제는 녹말, 글리코겐의 알파 아밀라아제의 결합만을 선택적으로 가수분해하고 아밀로펙틴과 글리코겐의 알파 1.6결합, 셀룰로오스의 베타 1,4결합에는 작용하지 않는다. 알파아밀라아제에 의한 녹말의 가수분해에 의해 덱스트린과 분자량이 비교적 큰 각종 올리고당이 생기고, 시간이 경과함에 따라 환원성 이당류가 생긴다. 녹말과 분자량이 큰 덱스트린은 요오드와 반응하여 푸른색을 나타내나, 이보다 분자량이 다소 작은 덱스트린은 적갈색, 훨씬 작은 덱스트린은 요오드에 의해 착색되지 않는다. 따라서 요오드 시약으로 녹말의 가수분해 정도를 확인할 수 있다. 30개 이상의 포도당 잔기를 갖는 전분을 침과 반응시키면, 파장 700nm에서 흡광도를 측정함으로서 알파아밀레이즈에 의한 전분 가수분해 정도를 측정할 수 있다.

=Dextrinizing power의 계산
(전분과 요오드복합체의 푸른색을 10% 감소시키는 활성을 가진 효소의 양)
D.P = (DO-D)/DO *10
D : 효소 반응 용액의 흡광도
D0 : 대조용액의 흡광도

-카테콜 산화효소라는 효소는 식물조직에서 발견된다. 카테콜산화효소는 식물세포가 손상을 받을 때 방출되는데 카테콜과 반응하여 벤조퀴논을 형성한다. 벤조퀴논은 박테리아를 제거하는 독소로서 손상된 식물조직이 부패하지 않게 도와주는 역할을 하며 특별한 갈색을 나타낸다.
2.
실험목적
* 아밀라아제의 온도에 따른 활성도를 측정해보자.
* 카테콜 옥시데이즈에 의한 벤조키논 생성에 미치는 온도의 영향을 알아 본다.
3.
실험도구
* 침, 워터배스, 인큐베이션, 시험관, 시험관집개, 인산염완충용액, 전분용 액, HCl용액, 요오드 용액, 흡광도기.
* 감자, 워터배스, 인큐베이션, 시험관, 시험관집개, 피펫, 카테콜용액
4.
실험방법
*아밀라아제 활성 측정
1. 침액을 모아 증류수로 희석한 후 절반씩 나눈다.
그중 하나는 37도의 물중탕 속에 두고 (효소액) 다른 하나는 대조군으 로 끓는 물에서 2분정도 가열한 후, 37도의 물중탕 속에 넣어둔다.
2. 1ml 효소액 + 1ml 0.05M 인산염완충용액 pH7 +1ml 1% 전분용액
1ml control ->37도에서 10분간 incubatation
3. 1ml 0.1N HCL 용액 + 0.5ml 요오드 용액 (0.05% iodine/0.5% KI)
4. 반응을 종결시키고 남은 전분이 요오드와 복합체를 형성함
5. 700nm에서 흡광도를 측정하도록 한다.

*카테콜 산화효소 활성 측정
5개의 테스트 튜브를 아래와 같이 만든다


시험관1
시험관2
시험관3
시험관4
시험관5

10
10
10
10
10
감자
-
O
O
O
O
카테콜
5
5
5
5
5
온도
실온
100
실온
0
40

->20분 후에 관찰한다.

 

원문 다운로드

 

출처 : 레포트샵    

일촌 및 팬들에게 공감한 내용이 전달됩니다.

 
 


관련 검색 검색
관련 지식이 없나요? 질문하기

친구와 함께 궁금증을 해결하세요!

로그인하면 친구 질문을 확인 할 수 있습니다. 네이트 로그인하기

친구에게 질문하기